S rozširovaním rozsahu kultúry a zvyšovaním hustoty kultúry sa ochorenie Apostichopus japonicus stalo čoraz významnejším, čo spôsobilo vážne straty v odvetví akvakultúry. Choroby Apostichopus japonicus sú spôsobené hlavne baktériami, vírusmi a nálevníkmi, medzi ktorými je najzávažnejší syndróm hniloby kože spôsobený Vibrio brilliant. S progresívnym ochorením sa na stenách tela Apostichopus japonicus tvoria vredy, modrobiele škvrny a nakoniec sa sám rozpúšťa a odumiera, rozpúšťa sa v nosovom hliene ako koloide. V tradičnej prevencii a liečbe chorôb sa široko používajú antibiotiká. Dlhodobé užívanie antibiotík však so sebou nesie nielen skryté nebezpečenstvo bakteriálnej rezistencie a zvyškov liekov, ale prináša aj bezpečnosť potravín a znečistenie životného prostredia. Preto je vývoj neznečisťujúceho, nereziduálneho a bezpečného prípravku na zníženie ochorenia morskej uhorky jedným z hlavných bodov súčasného výskumu.

Dimravčan draselný je biely kryštalický sypký prášok, suchý a bez chuti. Je to prvá kŕmna prísada bez antibiotika schválená Európskou úniou, ktorá nahrádza antibiotiká. Dokáže podporovať rast chovaných zvierat, potláčať rast škodlivých baktérií a zlepšovať črevné prostredie. Dimravčan draselný môže výrazne zlepšiť rast a výnos vodných organizmov.

1 Výsledky testov

1.1 Účinky dimravčanu draselného v strave na rast a prežitie morskej uhorky Apostichopus japonicus

Špecifická miera rastu Apostichopus japonicus sa významne zvýšila so zvyšujúcim sa obsahom dimravčanu draselného v strave. Keď obsah dimravčanu draselného v strave dosiahol 0,8 %, t. j. keď obsah dimravčanu draselného v strave bol 1,0 % a 1,2 %, špecifická miera rastu Apostichopus japonicus bola výrazne vyššia ako pri iných ošetreniach, ale nebol zistený žiadny významný rozdiel (P > 0,05) (tabuľka 2-2). Miera prežitia morskej uhorky bola 100 % vo všetkých skupinách.

1.2 Účinky dimravčanu draselného v strave na imunitné indexy morskej uhorky Apostichopus japonicus

V porovnaní s kontrolnou skupinou mohli rôzne hladiny dikarboxylátu draselného zlepšiť fagocytárnu kapacitu coelomocytov a produkciu O2 – v rôznej miere (tabuľka 2-3). Keď bol pridaný dimravčan draselný v množstve 1,0 % a 1,2 %, fagocytárna aktivita coelomocytov a produkcia reaktívnych foriem kyslíka O2 – v morskej uhorke bola významne vyššia ako v kontrolnej skupine, ale medzi skupinami s 1 % a 1,2 % dimravčanom draselným, ani medzi inými hladinami dimravčanu draselného a kontrolnou skupinou, neboli žiadne významné rozdiely. So zvyšujúcim sa obsahom dikarboxylátu draselného v krmive sa zvyšovali SOD a NOS morskej uhorky.

1.3 Vplyv dihydrátom draselným v strave na odolnosť morskej uhorky voči infekcii Vibrio brilliant

1,4 dňa po infekcii bola kumulatívna úmrtnosť morských uhoriek v kontrolnej skupine 46,67 %, čo bolo významne vyššie ako v skupinách s 0,4 %, 0,6 %, 0,8 %, 1,0 % a 1,2 % dimravčanom draselným (26,67 %, 26,67 %, 30 %, 30 % a 23,33 %), ale v skupine s 0,2 % diformianom nebol žiadny významný rozdiel (38,33 %). Úmrtnosť morských uhoriek v skupinách s 0,4 %, 0,6 %, 0,8 %, 1,0 % a 1,2 % dimravčanom draselným sa žiadny významný rozdiel nezistila.

2. Diskusia

2.1 Vplyv dikarboxylátu draselného na rast morskej uhorky Apostichopus japonicus

U zvierat spočíva mechanizmus účinku dikarboxylátu draselného hlavne vo vstupe do gastrointestinálneho traktu, zlepšení gastrointestinálneho prostredia, regulácii pH a ničení škodlivých baktérií (Ramli a Sunanto, 2005). Okrem toho môže dvojmravčan draselný tiež podporovať vstrebávanie živín v krmive a zlepšovať stráviteľnosť a mieru využitia u chovaných zvierat. Pri aplikácii u vodných živočíchov experimenty ukázali, že dvojmravčan draselný môže výrazne zlepšiť rast a mieru prežitia kreviet (he Suxu, Zhou Zhigang a kol., 2006). V tejto štúdii bol rast morskej uhorky (Apostichopus japonicus) podporený pridaním dikarboxylátu draselného do krmiva, čo bolo v súlade s výsledkami aplikácie dikarboxylátu draselného u prasiat a výkrmových ošípaných, ktoré uviedol Verland. M (2000).

2.2 Vplyv dikarboxylátu draselného na imunitu morskej uhorky Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus má rovnaký obranný mechanizmus ako ostatné ostnatokožce, ktorý je doplnený bunkovou a nebunkovou (humorálnou) imunitnou odpoveďou. Používa sa hlavne na identifikáciu a elimináciu cudzích telies vstupujúcich do tela zvieraťa alebo na premenu cudzích telies na neškodné látky a na hojenie rán. Bunkovú imunitnú odpoveď ostnatokožcov dopĺňajú rôzne coelomocyty, ktoré tvoria obranný systém ostnatokožcov. Medzi hlavné funkcie týchto buniek patrí fagocytóza, cytotoxínová reakcia a produkcia antibakteriálnych látok na úrovni koagulácie (kudriavtsev, 2000). V procese fagocytózy môžu byť coelomocyty indukované baktériami alebo zložkami bakteriálnej bunkovej steny na produkciu reaktívnych foriem kyslíka (ROS), vrátane NO, H2O2, OH a O2-. V tomto experimente pridanie 1,0 % a 1,2 % dikarboxylátu draselného do stravy významne zvýšilo fagocytárnu aktivitu coelomocytov a produkciu reaktívnych foriem kyslíka. Mechanizmus zvyšovania fagocytovej aktivity a produkcie O2- dimravčanom draselným je však potrebné ďalej študovať.

2.3 Vplyv dikarboxylátu draselného na črevnú flóru morskej uhorky Apostichopus japonicus

Dikarboxylát draselný sa môže v slabo alkalickom prostredí rozložiť na kyselinu mravčiu a formiát a preniknúť do mikrobiálnych buniek cez bunkovú membránu. Dokáže zmeniť životné prostredie škodlivých mikroorganizmov, ako sú Escherichia coli a Salmonella, zmenou hodnoty pH vo vnútri buniek a zabránením ich reprodukcie, čím reguluje črevnú mikroekologickú rovnováhu (eidelsburger, 1998). Vplyv dikarboxylátu draselného na črevnú mikroflóru: makroskopicky H+ vznikajúci rozkladom dikarboxylátu draselného znižuje hodnotu pH v čreve a inhibuje rast črevnej mikroflóry. Mikroskopicky H+ vstupuje do bakteriálnych buniek cez bunkovú membránu, priamo ničí aktivitu intracelulárnych enzýmov, ovplyvňuje metabolizmus mikrobiálnych proteínov a nukleových kyselín a hrá úlohu pri sterilizácii (Roth, 1998). Výsledky ukázali, že dimravčan draselný mal malý vplyv na celkové črevné baktérie morskej uhorky, ale mohol by významne inhibovať počet vibrií.

2.4 Vplyv dikarboxylátu draselného na odolnosť morskej uhorky Apostichopus japonicus voči chorobám

Vibrio splendens je patogénna baktéria spôsobujúca syndróm hniloby kože morských uhoriek, ktorá je škodlivá pre produkciu a pestovanie morských uhoriek. Tento experiment dokázal, že pridanie dikarboxylátu draselného do krmiva znížilo úmrtnosť morských uhoriek infikovaných baktériou Vibrio brilliant. To môže súvisieť s inhibičným účinkom dimravčanu draselného na Vibrio.

3 Záver

Výsledky ukázali, že dikarboxylát draselný v strave mal významný vplyv na rast Apostichopus japonicus, mal pozitívny vplyv na nešpecifickú imunitu Apostichopus japonicus a zvýšil humorálnu a bunkovú imunitu Apostichopus japonicus. Pridanie dikarboxylátu draselného do stravy významne znížilo počet škodlivých baktérií v črevách morskej uhorky a zvýšilo odolnosť morskej uhorky infikovanej Vibrio brilliant voči chorobám. Záverom možno povedať, že dikarboxylát draselný sa môže použiť ako posilňovač imunity v krmive pre morské uhorky a vhodná dávka dikarboxylátu draselného je 1,0 %.